Ashley Michele Greene nasceu em Jacksonville, na Flórida. O seu pai Joe é um ex-marinha dos EUA e a sua mãe Michele uma correctora de seguros. Uma 'maria-rapaz', Ashley gostava de relacionar-se com o seu irmão mais velho, Joe, estando em actividades como taekwondo e a ganhar vários prémios nessa actividade. Ashley diz que não foi autorizada a disputar com as raparigas nas aulas de taekwondo, porque ela "batia nas meninas". Ela mesmo uma vez, acidentalmente, bateu num menino que ela gostava, deixando o nariz e o lábio a sangrarem. Ashley admite que ela era "uma ótaria pouco competitiva".
Durante os seus primeiros anos de adolescente, Ashley saía com raparigas mais velhas, que afectaram a sua autoestima quando ela percebeu que eram mais maduras e, na sua mente, mais bonitas que ela. Ashley descreve-se como uma "hot mess" quando era adolescente. A mãe de Ashley colocou-a em aulas de modelo para lhe melhorar a confiança, e Ashley começou a pensar em tornar-se modelo como carreira. Após ser informada que ela era muito baixa para ser modelo, Ashley considerou tornar-se Advogada e conseguir um diploma em Psicologia. Ela realmente convenceu os seus pais a deixarem-na sair da escola privada para participar num programa que tivesse direito e psicologia. No entanto, depois de fazer um anúncio publicitário, o que levou a aulas de representação, Ashley sabia o que fazer - representar.
Felizmente para Ashley, os seus pais a apoiaram e permitiram que ela se mudasse para Los Angeles aos 17 anos de idade. Devido às suas notas excelentes e aos créditos extra, ela foi capaz de acabar o ensino secundário mais cedo para seguir o seu sonho de representação.
Por três anos, Ashley esforçou-se para encontrar papéis para representar. Ela conseguiu pequenos papéis aqui e ali, em programas de TV como Punk'd e Crossing Jordan, e alguns papéis de cinema muito pequenos em Shrink e King of California.
A grande oportunidade de Ashley veio quando começaram as audições para o filme Twilight, baseado na série de livros populares de Stephanie Meyer. Ela fez o teste para Bella Swan, mas como ela mesma diz "eu não era a Bella". Foi, depois, chamada para um teste para o papel de Alice Cullen. Depois de um longo processo de audições, foi dito a Ashley que ela tinha conseguido o papel.
Ashley já tinha trabalhado em restaurantes, mas tal e qual como o resto dos seus colegas e companheiros do elenco de Twilight, Ashley encontrou-se a ela própria subitamente na ribalta. Embora ela diga que não recebe o mesmo tipo de loucura como os rapazes - especialmente Rob Pattinson. Ela diz que a maioria dos fãs que se relacionam com ela num nível de "melhor amigo" em vez de gritarem com ela histericamente.
Ashley já começou a filmar outros filmes e tem grandes esperanças para a sua carreira fora da saga Twilight. Ela diz que quer ser um super-herói, uma Bond Girl e, possivelmente, Wonder Woman em projectos futuros.
